发明专利案例：一种肿瘤组织TIL细胞制备方法及专用培养基

发布时间：2020-09-22

授权公告号：CN107384867B

授权公告日：2020.09.11

申请号：2017106620016

申请日：2017.08.04

同一申请的已公布的文献号：CN107384867A

申请公布日：2017.11.24

专利权人：北京世纪劲得生物技术有限公司

发明人：李霞云;

地址：101200北京市平谷区密三路（马昌营段）388号院6幢

专利代理机构：北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419

代理人：王玉松

对比文件：CN 104946589 A,2015.09.30; CN 103243071 A,2013.08.14; CN 101037668 A,2007.09.19; CN 102174469 A,2011.09.07
S.Zhou等.Isolation and Identification of Cancer Stem Cells from Human Osteosarcom by Serum-free Three-dimensional Culture Combined with Anticancer Drugs.《J Huazhong Univ Sci Technol》.2010,第30卷(第1期),第81-84页.; 李彪如等.酶消化对肿瘤浸润淋巴细胞活力影响的研究.《实验生物学报》.1994,第27卷(第1期),

摘要：本发明涉及肿瘤组织TIL细胞制备方法及专用培养基，所述方法包括：瘤旁组织获取、细胞消化、细胞原代培养、细胞传代培养和细胞收集步骤，其中，原代培养基为以RPMI 1640培养基为基础，包含以下浓度组分：10％体积的人源血清、2045ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、15mg/ml的核黄素、7090ng/ml的皮质醇、1025mg/ml的一水磷酸二氢钠、4762ng/ml的重组人白血病抑制因子(LIF)、500800U/ml的IL2；传代培养基为以RPMI 1640培养基为基础，包含以下浓度组分：10％体积的人源血清、2040mmol/L的HEPES、10002000U/ml的IL2、0.030.07mmol/L的β巯基乙醇、515ng/ml磷酸钠。对现有培养基进行了改良，采用不同的培养基对TIL细胞进行针对性培养，提高TIL细胞的扩增能力，同时减少培养周期，降低培养复杂程度，减少了IL2的使用量，从而降低毒性反应。